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降鈣素試劑盒（酶聯(lián)免疫檢測法）

ELISA方法操作孵育過程常見問題及解答
1） 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2） 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。

3）孵育溫度未按照說明書要求進(jìn)行，溫度過高或過低；
解決辦法：
1） 貼封片或加蓋；
2） 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間和孵育溫度。

通用名稱：降鈣素試劑盒（酶免法）
英文名稱：Calcitonin ELISA
產(chǎn)品貨號：NM59011
產(chǎn)品規(guī)格：96T
檢測樣本：血清
公司品牌：德國IBL
儲存條件：2-8℃
檢測方法：ELISA方法
預(yù)期用途：可用于人血清中降鈣素的定量檢測
參考價格：詢價
供應(yīng)商家：深圳市科潤達(dá)生物工程有限公司

預(yù)期用途
此降鈣素檢測試劑盒可用于人血清中降鈣素的定量檢測。

檢測原理
此試劑盒采用雙位點酶免法檢測降鈣素完整的32氨基酸鏈。利用兩種不同的人降鈣素小鼠單抗，生物素標(biāo)記的抗體結(jié)合降鈣素11-23的氨基酸，另外一個HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合21-32的氨基酸。實驗中，標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)控品或病人樣品與兩標(biāo)記抗體同時加入至包被有鏈霉親和素的包被孔內(nèi)溫育。

樣本中的降鈣素則會夾在兩抗體間，溫育結(jié)束后，洗去未結(jié)合成分，然后再加入底物液溫育，終止液加入終止反應(yīng)，溶液顏色變?yōu)辄S色，樣本中降鈣素的量與顏色的強(qiáng)度成正比，以標(biāo)準(zhǔn)品的吸收值和濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線，則樣本濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得

試劑盒組成成分
●微孔板——12×8——即用型、包被有鏈親和霉素
●試劑1——1×7.0ml——即用型、含生物素標(biāo)記的降鈣素抗體
●試劑2——1×7.0ml——即用型、含HRP標(biāo)記的降鈣素抗體
●試劑3——1×10.0ml——即用型、含EDTA的配制液
●試劑A——1×30.0ml——20倍濃縮洗滌液
●試劑B——1×20.0ml——即用型、含TMB
●質(zhì)控品1+2——2×——凍干品、具體濃度見瓶身標(biāo)簽
●標(biāo)準(zhǔn)品A~F——6×——凍干品、具體濃度見瓶身標(biāo)簽
●終止液——1×20.0ml——即用型、含1N硫酸

降鈣素檢測所需材料（試劑盒內(nèi)不提供）
●移液器，50,100和150ul體積
●振蕩器
●8-通道移液器
●洗瓶，自動或半自動洗板機(jī)
●酶標(biāo)儀
●去離子水或蒸餾水
●吸水紙，槍頭，計時器

儲存條件
降鈣素檢測試劑盒應(yīng)當(dāng)在2~8℃運(yùn)輸和儲存，避免高溫和陽光直射。

檢測步驟
●標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)控品和樣本吸取100ul至相應(yīng)的孔內(nèi)，剩余的標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控用完后立即放回至-20℃凍存，不能儲存在自動除霜凍存機(jī)內(nèi)
●每孔加100ul的試劑1
●每孔加50ul的試劑2
●蓋板，170±10rpm，室溫下（18-25℃）溫育4小時±30分鐘
●倒去孔內(nèi)溶液，用工作洗滌液洗板5次，如果用全自動洗板機(jī)，則每孔加350ul的洗液洗滌
●每孔加150ul的試劑B（TMB底物液）
●蓋板，170±10rpm，室溫下（18-25℃）溫育30±5分鐘
●每孔加100ul的終止液
●加入終止液10min內(nèi)在酶標(biāo)儀上讀數(shù)，用250ul的去離子水校正450nm，同樣的校正405nm

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